众多研究领域，如环境监测、生物研究或废水研究，能够检测或定量测量一氧化氮。


中国专利公告号CN215179985U公开了一种一氧化氮检测仪，包括：气体收集模块，设有归零气路和检测呼出气体一氧化氮的检测气路；气体处理模块，用以稳定流速、干燥及去除干扰气体；一氧化氮检测模块，由三个电化学一氧化氮传感器并联而成；数据处理传输模块，用以转换、传输及显示数据；控制模块和电源模块。该发明中的检测仪体积过大，测量过程比较麻烦，成本较高，无法测量土-水界面、沉积物-水界面、水-气界面、土-气界面等界面处的微观区间内的变化，测量沉积物时也会破坏底泥所处环境。


为此，本申请提出了用于检测溶解性一氧化氮的电化学微电极及其测定方法，用于溶解性一氧化氮进行检测。

一种用于电化学微电极的制备方法，包括以下步骤：


步骤1：将一根直径0.1mm、纯度99.99％的铂丝4放入锥形毛细管中，将该锥形毛细管固定在加热线圈中间位置，打开电源调节变压器，使得锥形毛细管熔化并在重力的作用下将铂丝4包裹起来。


步骤2：将包有玻璃的铂丝4尖端置于饱和KCN溶液中，进行腐蚀，露出铂丝4长度100-200μm，继续腐蚀直至铂丝4直径50-100μm左右。随后用去离子水、稀硫酸、无水乙醇对裸露铂丝4进行冲洗。

步骤3：以直径1mm的铂丝4为正极，铂丝4电极为负极，在1.5V的直流电压下置于饱和氯铂酸溶液中在铂丝4电极尖端裸露处电镀30s，镀铂黑长度100-200μm。


步骤4：将一根外径8mm，内径6mm的巴斯德硼硅酸玻璃管垂直固定在微型操作器上，通过加热线圈和调节变压器，加热玻璃管较细开口端，拉制为尖端状，尖端外径50-100μm，作为NO电极的外套管。


步骤5：用打磨机将外部套管9尖端磨平，清洗干净，从尾端向其管内注入少量膜后电解液8，排除尖端空气，再把硅橡胶均匀涂在载玻片上，用外部套管9尖端在载玻片上轻轻蘸一下，在显微镜下观察，硅橡胶膜5厚度为20-40μm，放置24h硅橡胶膜5固化。


步骤6：取饱和氯化钾溶液，以银丝2作为负极，碳棒作为正极，在1.5V直流电压下在银丝2了电镀AgCl制成内部参比电极。

步骤7：将感应阴极7插入到外部套管9中，感应阴极7铂丝4尖端距硅胶膜50-100μm，在将内部参比电极Ag/AgCl插入外部套管9中，在内部套管3、内部参比电极和外套管内侧接触面滴入几滴环氧树脂密封胶，放置24h固化。


步骤8：在外套管内部注入电解液8，再将保护阴极1银丝2插入到外套管内部，保护阴极1尖端距铂丝4尖端200-500μm，外套管与内套管之间用环氧树脂密封。


综上所述，本发明上述实施方式所揭露的技术方案至少具有以下优点：


1、使用硼硅酸玻璃管制作电极，工艺简单，价格便宜，电极结构易于加工成型，微米级别的测量尖端使得电极具有极高的分辨率、高灵敏度、较短的响应时间。


2、微米级别电极尖端可以做到较小创伤的测量沉积物15底泥剖面、生物膜等表面破损易受到周围环境影响的体系。


3、细小又平整的测量尖端可以测量到微观环境内的微米级别不同深度的NO的浓度变化。


4、增加保护阴极1，可以消耗感应阴极7后端的NO气体，最大限度增加感应阴极7的使用寿命。


本发明采用微电极17在微生物和环境界面微观区域内，通过微电极17尖端内部镀铂黑尖端实现对NO的选择性识别，测定微生物内部和环境界面不同深度的电流变化，根据能斯特方程，继而实现获取微生物内部和环境界面不同深度的NO浓度实时变化情况。