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1.2样品分析与数据处理
每个采样点还分别采集沉积物柱状样,当天运回实验室。在20℃室温下,使用丹麦的微电极系统(Unisense A/S,Arbus,丹麦)对沉积物~水界面O2、H2S、氧化还原电位(Eh)、pH进行测定,垂向测量间隔为500μm.总氮(TN)浓度采用碱性过硫酸钾消解法测定;总有机碳(TOC)浓度采用总有机碳分析仪测定(Multi N/C 3100,德国Jena公司),准确称取0.05 g冷冻干燥后的沉积物样品至燃烧舟中,用0.5 mol/L的HCl浸润样品酸化,并置于烘箱中60℃干燥8 h以上,上机测试。叶绿素a和脱镁叶绿素含量使用丙酮提取,紫外分光光度法测定。含水率和烧失量分别按GB 7172-1987和GB 7876-1987测定。蛋白质(PRT)含量用改进的Lowry法测定,称取0.25 g冷冻干燥后的沉积物样品于10 ml离心管中,加入6 ml的0.1 mol/L的NaOH溶液,置于摇床在60℃下提取2 h后,冷却至室温后在3000转/min离心10 min,在10 ml离心管中先加入1 ml蛋白质提取物,再加入5 ml碱性铜溶液,混匀静置10 min后加入0.5 ml的1 mol/L福林酚试剂立即摇匀,静置30 min使反应完全,于750 nm测定吸光度;总糖(CHO)用苯酚~硫酸法测定,称取0.5 g冷冻干燥后的沉积物样品于50 ml离心管中,加入20 ml高纯水,超声混合均匀,取2 ml上述混合样品,加入2 ml苯酚溶液和10 ml浓硫酸,立即混合均匀,4000——5000转/min离心30 min,于485 nm测定吸光度;总脂(LIP)用甲醇~氯仿法测定,称取0.25 g冷冻干燥后的沉积物样品至50 ml离心管中,加入20 ml混合液(pH=7.4磷酸盐缓冲液:氯仿:甲醇=0.8:1:2)后用涡旋振荡器混匀,置于暗处静置2 h后,以5000转/min离心10 min,将上清液转移至试管中,向上清液中加入5.26 ml氯仿、5.26 ml磷酸盐缓冲液,静置过夜使其分层,用移液器吸取2 ml下层萃取液至25 ml比色管中,用氮气在50℃下吹干。氮气吹干后加4 ml浓硫酸,在电热板中200℃加热15 min,然后加入6 ml蒸馏水,摇匀,冰浴10 min后,于375 nm测定吸光度值。每个样品设置3个重复,用于计算平均值及标准偏差。
利用Excel和Origin 9.0软件对实验各类数据进行整理作图;采用SPSS 19.0软件进行单因素方差分析(One-way ANOVA)。
2结果与讨论
2.1沉积物理化特性的垂向变化特征
藻型湖区沉积物~水界面处DO、pH和Eh在垂向剖面上呈现出随深度增加而下降的趋势,空间上存在明显的异质性,湖滨带(L1和L2)沉积物~水界面DO、pH和Eh显著低于开敞湖区(C1和C2,P<0.01)。水体中DO的垂向分布比较稳定,湖滨带和开敞湖区水体DO的均值分别为115.7±3.5和150.8±3.4μmol/L,DO的渗透深度分别为2.3±0.4和3.3±0.4 mm,在深度3.5 mm以下DO浓度降低至零,且保持稳定的状态(图2a)。不同监测点位沉积物pH值也存在明显差异,整体呈现随深度增加而下降的趋势,开敞湖区沉积物整体以碱性条件为主,而湖滨带的沉积物随着深度的增加,由碱性逐渐向酸性条件转变(图2b)。沉积物~水界面Eh的垂向分布规律与DO类似,开敞湖区沉积物Eh大于350 mV(图2c),而湖滨带有大量藻源性有机碎屑作为还原性物质加入后,使得Eh不断降低,这与Ding等研究结果较为一致。由于藻类的暴发、聚积和腐解过程,往往是在水柱和沉积物表层发生的,当大量的藻类残体沉降到沉积物表层后,将会发生沉积物~水界面生物地球化学过程。首先藻类的大量聚积沉降会影响沉积物~水界面的氧化还原环境,沉积物本身就存在化学好氧和微生物好氧作用,当藻类碎屑残体沉降到沉积物表层后,沉积物~水界面氧的消耗作用加快。因此,当藻类碎屑残体消耗溶氧后,随着深度增加沉积物中DO和Eh就呈现下降趋势,形成厌氧强还原的状态。
图2沉积物~水界面DO、pH、Eh和H2S浓度的剖面分布
沉积物~水界面H2S的垂向上则表现为随深度先降低而后升高的趋势(图2d)。在3.5 mm深度附近H2S浓度降到最低,之后随深度增加而逐渐升高,湖滨带沉积物中H2S浓度明显高于开敞湖区,湖滨带(L1)沉积物中H2S浓度峰值为12.6μmol/L,而开敞湖区(C2)H2S浓度峰值仅为2.5μmol/L.究其原因,由于硫酸盐的还原是水生物环境中H2S产生的重要途径,硫酸盐还原菌利用硫酸根作为电子受体进行无氧呼吸作用产生H2S,研究表明,蓝藻衰亡腐解过程促进了硫在沉积物中的累积,此外H2S是蛋白质在厌氧介质中分解的产物,而藻细胞中含有硫氨基酸,在微生物作用下转化为一系列硫化合物,因而在厌氧沉积物中,藻类腐解的产物在H2S产生中起着重要的作用。
随着深度的增加,沉积物含水率和烧失量同样呈现出下降的趋势,湖滨带(L1和L2)沉积物含水率和烧失量均高于开敞湖区(C1和C2),开敞湖区表层15 cm以上沉积物含水率和烧失量较高,而后逐渐趋于稳定(图3)。究其原因,由于湖滨带沉积物主要以蓝藻碎屑和水草残体淤积为主,而开敞湖区主要以悬浮泥沙为主,故导致湖滨带沉积物烧失量远高于开敞湖区。
图3沉积物中含水率和烧失量的垂向变化