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2、结果与分析
2.1敏感硫电极法标准曲线
S2-浓度在100-1000nmol/l之间浓度值与硫电极所测电压值呈线形相关性（图1-1），所得方程为
y=-0.034x2+74.663x-42633,R2=0.9619
S2-浓度在1-100µmol/L之间浓度值与硫电极所测电压值呈明显对数相关性(图1-2)，所得方程为
y=34.505 Ln(x)+963.63,R2=0.9847.
S2-浓度在40-10000µmol/L之间浓度值与硫电极所测电压值呈明显对数相关性(图1-3),所得方程为
y=13.861Ln(x)+1048.6,R2=0.9956
图1-1敏感硫电极所测标准曲线：S2-浓度在100-1000nmol/l之间呈线形相关
图1-2敏感硫电极所测标准曲线：S2-浓度在1~100µmol/L之间呈明显对数相关
图1-3敏感硫电极所测标准曲线：S2-浓度在40~10000µmol/L之间呈明显对数相关
2.2各组大鼠各系统H2S生成酶与含量比较
表1大鼠运动前后不同组织硫化氢含量与生成酶活性均数
大鼠各硫化氢生成酶活性均数(nmol/min·mg)硫化氢含量（nmol/mg）系统对照组运动组比值对照组运动组比值骨骼肌
0.0790.14179%↑0.4362.843552.2%↑脑组织0.1370.134基本持平
0.4480.0371120.9%↓肝脏8.61414.27765.7%↑0.0590.580889.9%↑肺脏0.0070.1632254.4%↑0.0400.05227.9%↑肾脏3.2364.49538.9%↑0.3991.825357.2%↑心脏0.0360.277662.7%↑0.6785.422700%↑血浆0.0100.100900%↑
3、分析与讨论
运动改善血管的舒张反应性与硫化氢有密切关系。运动训练可以使硫化氢生酶基因转录活性增强造成硫化氢含量升高；内源性产生的硫化氢可以通过开放平滑肌细胞上KATP通道舒张血管平滑肌，从而抑制血管平滑肌细胞的增殖反应,抑制血小板粘附聚集等。利用运动训练可以延缓某些心血管疾病的发生和发展,而且对这些疾病也有一定的治疗作用,尤其是在血管的保护和改善方面具有重要意义。
本实验结果显示，运动可以刺激硫化氢生成酶活性上调，并相应增加硫化氢的生成量。已知NO可增加H2S的舒张血管效应和产量，大鼠内源性H2S在运动后的升高可能与NO有关。而一次性大强度运动可使内源性NO生成量升高，从而使H2S生成酶活性升高进而使H2S含量升高。运动引起H2S/生成酶系统活性上升的机制可能与运动提高了血流对血管壁产生的剪切应力有关，它增加了一氧化氮合酶的活性。有报道称运动使血流对血管壁产生的剪切应力增大同时也使硫化氢生成酶活性提高，但究竟是剪切应力通过增加一氧化氮合酶的活性而使一氧化氮含量升高进而造成硫化氢生成酶活性升高，还是剪切应力的增大直接使硫化氢生成酶活性升高?文献中并没有注明，我们不得而知。一次性大强度运动可明显影响各组织代谢酶活性，目前公认的结论是：一次性大强度运动可增加各个组织无氧代谢酶活性，如乳酸脱氢酶（LDH）活性，从而提高组织无氧代谢能力。对H2S调节机体代谢的研究结果显示，机体吸入生理剂量H2S后，骨骼肌LDH活性增加，由此提出：硫化氢增加人体在运动过程中无氧代谢的能力，提高机体的适应能力。本研究发现，一次性大强度运动后各组织H2S/生成酶系统活性上升，这一变化特点正好与大强度运动使机体无氧代谢酶活性增高相同。推测一次性大强度运动使机体无氧代谢酶活性的升高与H2S/生成酶系统活性的上升有着必然联系，或者说：H2S/生成酶系统活性上调从而使组织无氧代谢酶活性升高进而提高组织无氧代谢能力。
对18名受试者，其中健康组6人(未从事任何锻炼)，一般运动组6人，运动组6人（加拿大奥运划船选手）进行两种形式的运动：递增力竭运动，保持不同功率值的运动，检测运动前后NO呼出量变化，结果表明，运动时运动员组内源性NO呼出量明显高于其他两组，且这种NO量增加与VO2及心率密切相关。因为内源性硫化氢和内源性一氧化氮性质相似且NO与H2S的生成关系密切，可以推测内源性H2S量的增加与VO2及心率有着必然联系。虽然此推测无法从根本解释运动前后大鼠各个器官系统硫化氢含量变化的原因，但通过绘制硫化氢含量与这些指标的关系曲线，找出两者之间的相关性。此可作为以后检测内源性H2S含量的简易方法。
NO是一种内源性血管舒张因子，可以调节内皮细胞、平滑肌细胞和神经细胞的功能，同时参与低氧时细胞内某些低氧敏感基因表达的调节。H2S与NO具有相似的生物学特性，两者既相互独立又相互影响，在机体内形成一个复杂的调控网络。研究表明，急性运动可引起机体分泌NO增多，并引起冠状动脉及其它血管的舒张，增加心肌、骨骼肌的血流量。本实验结果发现，一次性大强运动使各个系统（脑组织除外）硫化氢含量有明显的升高。
NO和H2S之间的作用是协同还是拮抗？我们现在能肯定的是不同的运动方式这两种气体信号分子之间的相互作用不尽相同。一次性大强度运动NO和H2S之间表现为协同作用。通过实验证实，NO可以与H2S协同发挥舒血管效应。研究表明，NO的供体硝普钠可以剂量依赖性地上调内源性H2S的生成，应用鸟苷酸环化酶的抑制剂ODQ后，再应用硝普钠，内源性H2S的生成量明显降低，因而推测这种上调效应可能是通过cGMP（cyclic guanosine monophosphate,环鸟苷酸）途径实现的。
运动后大鼠脑组织硫化氢含量为什么不升反降?对于此现象的解释也与NO有紧密联系：脑组织中的NO合酶为诱导型（inducibleNOS,iNOS）iNOS诱导合成需4-8小时，如果时间达不到，iNOS还未合成NO不可能增多。而大鼠脑组织中的硫化氢生成酶胱硫醚-β-合酶（CBS）也有类似于iNOS性质—合成需要一定时间。此实验是运动后即刻取样测定，从前表即可看出硫化氢酶的含量基本没有变化，所以硫化氢的含量不可能升高。它为何大幅度降低的原因可能是运动后循环加快将原有的硫化氢通过血液循环代谢并清除。
本次研究发现，运动组大鼠各组织H2S含量H2S含量及其生成酶活性变化一致。提示本实验运动模式是通过改变H2S生成酶活性来提高或降低H2S的产生和释放。一次性大强度运动使大鼠脑组织硫化氢含量有大幅度降低，而使其他各组织硫化氢含量有不同程度的提高。
一次性大强度运动除使大鼠脑组织硫化氢生成酶活性略有降低外，其余各组织均有不同程度的升高。
4、小结
敏感硫电极法测量范围广，敏感性强，稳定性和重复性均良好，可应用于大鼠脑,心脏，肾脏，肝脏，肺，骨骼肌H2S测定的研究。但在测试血浆H2S含量时精确度略显不够。经一次性大强度运动后，与对照组相比大鼠心脏，肺脏，肝脏，肾脏，骨骼肌器官的H2S/生成酶体系均有不同程度的提升。推测由于运动使内源性一氧化氮升高从而造成H2S/生成酶体系的升高。由于一次性大强度运动可增加各个组织无氧代谢酶活性，推测一次性大强度运动使机体无氧代谢酶活性的升高与H2S/生成酶系统活性的上升有着必然联系。大鼠运动后脑组织H2S/生成酶系统活性降低的原因还不是十分清楚，推测测定时大鼠脑组织中的硫化氢生成酶CBS还未合成。大鼠血浆硫化氢浓度变化趋势同大鼠其它组织，验证了血管平滑肌CSE在大鼠运动后的表达同其它各组织。
